WB實驗之內參蛋白的選擇

2024-09-29 在進行WB（WesternBlot）實驗時，選擇合適的內參確實至關重要。內參的主要作用是像一把“尺子”，用來衡量和校正每個樣本的上樣量，以及在上樣過程中可能產生的實驗誤差。這樣，我們就可以更加確信實驗結果的準確性，因為它們已經經過了內參的校正。一、選擇內參需要遵循的原則？1.樣本種屬來源匹配性原則：內參蛋白的選擇應基于實驗樣本的物種來源。對于哺乳動物細胞和組織樣本，常用的內參包括β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB等。這些蛋白在哺乳動物細胞中表達穩定，...

為了獲得完整的全血RNA，血液采集和抽提有什么建議嗎？

2024-09-29 首先血液通常在臨床地點采集，但在其他地方進行RNA分離處理。這導致在運輸和RNA純化之前需要RNA穩定。血液含有復雜的細胞成分，含RNA的目標細胞白細胞，占細胞質量的1%以下。血液中含有的生化物質會影響下游的應用。如RNA酶、抗凝血劑和血紅素等，需要有專業的產品進行純化。凱杰提出了解決方案：一、EDTA抗凝管采集的新鮮人全血，可搭配QIAampRNABloodMiniKit（貨號：52304）來提取高質量的總RNA（＞200nt）；二、采用PAXgenBloodRNATube...

FUJIFILM Wako——CLEM用熒光蛋白表達載體

2024-09-29 FUJIFILMWako推出了適用于光電關聯顯微技術（CLEM）的熒光蛋白表達載體。載體表達的熒光蛋白（CLEM-Red,CLEM-Green）可通過CLEM用熒光恢復試劑（TUKSolution,TUKSolutionformulticolor）恢復被氧化鋨淬滅的電子顯微鏡樣品中的熒光，從而實現使用光學顯微鏡和電子顯微鏡觀察同一切片。◆載體概要◆產品一覽購前須知：本系列載體僅供科研使用。如有需要，請聯系FUJIFILMWako代理——天津益元利康生物科技有限公司！FUJIF...

為什么CCK8鏡下趨勢是對的，測出來的OD值卻不對？？

2024-09-27 CCK-8實驗中，鏡下趨勢正確但測出的OD值不準確的問題可能由多種原因導致。那么影響CCK8結果的因素到底有哪些？一、細胞接種數量過多首先，細胞接種數量過多可能導致OD值過高。當細胞數量過多時，它們可能會重疊生長，導致測得的OD值偏高。此外，如果細胞密度過高，可能會影響藥物的均勻分布，從而影響實驗結果?。二、藥物作用時間不足或鋪板細胞密度太大其次，藥物作用時間不足或鋪板細胞密度太大也可能導致測量不準確，都可能影響到細胞的生長狀態和最終測得的OD值?。三、誤差操作過程中的誤差也...

Wnt信號通路

2024-09-27 一、Wnt信號通路簡介Wnt在1982年shou次在小鼠胰腺癌中發現，由于此基因激活依賴小鼠乳腺癌相關病毒基因的插入，因此，當被命名為Int-1。之后的研究表明，Int1基因在小鼠正常胚胎發育中發揮重要作用，與果蠅的無翅（Wingless）基因功能相似，均可控制胚胎的軸向發育。此后大量研究提示Int1基因在神經系統胚胎發育中的重要性。因兩者基因與蛋白功能的相似性，研究者將Wingless與Int1合并，賦名為Wnt基因。人Wnt基因定位于12q13。在胚胎發育中，Wnt基因調...

ROS的檢測方法

2024-09-27 ROS在細胞生命，應激和死亡中具介導作用，今天讓我們來聊下ROS吧~一、ROS簡介活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）廣泛指代氧來源的自由基和非自由基，包含了超氧陰離子（O2-）、過氧化氫（H2O2）、羥自由基（OH-）、臭氧（O3）和單線態氧（1O2），由于它們含有不成對的電子，因而具有很高的化學反應活性。在機體內，ROS的主要來源之一是線粒體內膜的呼吸鏈底物端，在線粒體中的電子傳遞鏈復合物將電子傳遞給O2的過程中，有一部分O2被還原，形成O2-或H...

無血清培養基配方、使用方法

2024-09-26 一、前言細胞培養技術在生命科學研究領域是must的。在科研上，細胞培養基（medium）一般都會加入血清（Serum）來補充蛋白質（protein）、生長因子（growthfactor）或其他營養物質（nutrients）等，大部分細胞培養會選擇使用胎牛血清（fetalbovineserum,FBS）。近年來也陸續有多樣的血清種類，例如：人類血小板生長因子（platelet-richplasma,PRP）、小牛血清（bovinegrowthserum,BGS）等，中科百抗自研...

細胞培養的一般過程

2024-09-26 一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。二、取材在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的shou次培養稱為原代...