常見實驗動物抓拿固定手法

2024-10-23 （一）小白鼠(mouse)習慣用右手的同學，建議使用右手抓住小鼠尾部，將其提起并放在鼠籠鐵紗網上或粗糙物上。在小鼠向前掙脫時，用左手的拇指和食指抓住其頸部皮膚，并以左手的小指和掌部夾住其尾部。空出的右手進行后續實驗，習慣用左手的同學則相反操作。（二）大白鼠(rat)習慣用右手的同學，建議戴上防護手套，用右手抓住大鼠尾巴中部提起，左手按住背部皮膚。可使用手術臺固定，將大鼠四肢放入手術臺松緊環內，收緊環扣以固定。空出的右手進行后續實驗，習慣用左手的同學則相反操作。（三）豚鼠(ca...

新生牛血清含有豐富的營養成分

2024-10-23 新生牛血清主要來源于剛出生的小牛。在小牛出生后的短時間內，通過無菌操作采集其血液，經過離心、分離等步驟，提取出血清部分。由于新生牛血清中含有大量的生長因子、細胞因子和其他生物活性物質，因此具有較高的營養價值和生物活性。新生牛血清的制備方法：1.采血：在無菌條件下，從小牛頸靜脈或心臟穿刺采血，避免污染。2.離心：將采集到的血液放入離心管中，進行高速離心，使血細胞與血清分層。3.分離：用無菌吸管將上層血清吸出，避免吸取到下層的血細胞。4.過濾：將分離出的血清通過0.22微米的濾膜...

原核生物基因表達的特點及調控機制

2024-10-22 一、原核生物基因表達的特點1.只有一種?RNA聚合酶?原核生物只有一種RNA聚合酶，負責所有基因的轉錄過程。2.?以?操縱子為基本單位?原核生物的基因表達以操縱子為單位，將功能相關的基因組織在一起，同時關閉或開啟基因表達，既經濟有效，又保證其生命活動的需要。?3.轉錄和翻譯偶聯進行?原核生物的轉錄和翻譯是偶聯進行的，mRNA合成后立即用于蛋白質合成，無需中間存儲。（如需mRNA合成試劑盒可以選擇CELLSCRIPTT7ARCA加帽mRNA合成試劑盒）?4.mRNA翻譯起始部位...

蛋白電泳條帶大小不合的原因

2024-10-21 蛋白電泳條帶大小不合怎么辦，本文為您解答一下。一、蛋白電泳條帶大小不合原因?1.凝膠配制問題?：凝膠配制過程中組分比例不合理、溫度、陽光、雜質等外界因素的影響可能導致丙烯酰胺聚合不wanquan，從而影響條帶的分離效果?。?2.電泳條件問題?：電泳時電壓過高、溫度過高、電泳速度過快等條件設置不當，可能導致條帶大小不合?。?3.樣品處理問題?：樣品未wanquan變性或含有未清除的雜質，也可能導致電泳條帶大小不合?。?二、蛋白電泳條帶大小不合解決方法??1.檢查凝膠配制?：確保...

PEG在核酸提取中的具體應用

2024-10-21 一、PEG是什么？PEG，聚乙二醇是一種高分子聚合物，無刺激性，味微苦，具有良好的水溶性，并與許多有機物組分有良好的相溶性。具有優良的潤滑性、保濕性、分散性、粘接性，可作為抗靜電劑及柔軟劑等使用，在化妝品、制藥、化纖、橡膠、塑料、造紙、油漆、電鍍、農藥、金屬加工及食品加工等行業中均有極為廣泛的應用。其分子式為HO(CH2CH2O)nH，其中n代表聚合度，決定了PEG的分子量。PEG具有良好的水溶性、無毒性、生物相容性和化學穩定性，這些特性使得PEG在生物醫學領域得到了廣泛應用...

qPCR的CT值為何定在15-35之間？

2024-10-17 一、擴增曲線擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，擴增曲線一般以循環數(Cyclenumber)為橫坐標,熒光強度(Fluorescenceintensity)或信號量(Signalamount)為縱坐標。典型的擴增曲線可以分成四個時期：基線期、指數期、線性期和平臺期。基線期：擴增曲線的水平部分，通常在PCR反應的前幾個循環（3-15個循環）內。此階段擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物生成量的變化。儀器軟件會基于這階段的熒光信號計算出基線范圍。指數期：PCR擴增的...

同型對照抗體是什么？如何使用？

2024-10-17 一、什么是同型對照抗體？同型對照抗體是一種與檢測抗體（一抗）相同種屬、相同種型（和亞類）、具有相同標記物的但對目標抗原無特異性識別能力的一抗。檢測抗體和同型對照抗體唯1的區別在于對待測樣本中目標抗原的特異性識別能力。檢測抗體能在代測樣本中特異性識別并結合目標抗原，而同型對照抗體不會特異性結合任何存在待測樣本中的抗原，其他屬性二者是完權一致的。二、為什么需要同型對照抗體？在流式細胞術（FC）和免疫組織化學（IHC）等實驗中，有很高的背景染色風險，我們會發現抗體與細胞的結合，可以...

RAW 264.7細胞傳代和凍存

2024-10-16 一、傳代培養傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。二、RAW264.7細胞傳代步驟在進行RAW264.7細胞傳代時，首先需要將舊培養基棄去，并...