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HGC-27細胞培養(yǎng)指南 | 實驗步驟與防污染技巧(新手必讀)
2025-03-11
HGC-27細胞是一種來源于人胃癌患者轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)的低分化胃癌細胞系,具有較強的侵襲性和增殖能力,常用于研究胃癌的分子機制、藥物篩選以及侵襲與轉(zhuǎn)移特性分析。它在體外呈上皮樣貼壁生長,呈多角形或短梭形,以單層形式生長。能夠在免疫缺陷小鼠中形成移植瘤,是胃癌相關(guān)研究的重要模型。一、實驗準備(關(guān)鍵物料清單)?細胞來源:建議從ATCC/中科院細胞庫獲取(批號可溯源)?培養(yǎng)基:RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗(Gibco品牌優(yōu)選)?儀器:37℃恒溫CO?培養(yǎng)箱(CO?濃度5%...
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無血清細胞凍存技術(shù)深度解析
2025-03-10
一、無血清細胞凍存技術(shù)演進里程碑1980s:胎牛血清(FBS)依賴時代(存活率<50%)2005:First商品化無血清凍存液(HSA替代方案)2020:重組蛋白替代血清(ISO13485認證)二、無血清細胞凍存核心配方組分組分類型作用機理典型濃度滲透壓調(diào)節(jié)海藻糖/蔗糖(玻璃化轉(zhuǎn)變保護)50-100mM膜穩(wěn)定劑羥yi基淀粉(抑制冰晶生長)5%w/v抗氧化系統(tǒng)谷胱甘肽+二氫硫辛酸1-3mM非蛋白保護劑泊洛沙姆188(機械應(yīng)力緩沖)0.01%三、無血清細胞凍存關(guān)鍵性能參數(shù)細胞類型...
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CHO細胞全解析|生物制藥的核心載體
2025-03-07
CHO細胞全解析|生物制藥的核心載體一、CHO細胞概要?CHO細胞(Chinesehamsterovarycell)?是一種從中國倉鼠卵巢細胞中分離出來的細胞系,具有無限分裂的能力,常用于生物制藥中的重組蛋白生產(chǎn)。CHO細胞具有多種優(yōu)點,如快速生長、易于培養(yǎng)、高產(chǎn)量等,因此被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是在蛋白質(zhì)表達和純化方面表現(xiàn)出色?全稱:ChineseHamsterOvary(中國倉鼠卵巢細胞)建系時間:1957年由TheodorePuck團隊建立二、CHO細胞關(guān)鍵特性蛋...
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百奧益康人腦組織通用解離試劑盒使用指南
2025-03-04
百奧益康人腦組織通用解離試劑盒該怎么使用呢?快來收看本期內(nèi)容。一、人腦組織通用解離試劑盒簡介本產(chǎn)品適用于人腦組織的細胞懸液的分離制備,本產(chǎn)品利用酶溫和、快速有效地破壞細胞外基質(zhì),釋放細胞,從而生成單細胞懸浮液。制備的單細胞懸液可用于單細胞測序、細胞培養(yǎng)或其他細胞相關(guān)檢測。二、人腦組織通用解離試劑盒使用說明【使用方法】準備工作:水浴鍋或雜交爐設(shè)置到37℃、配制含5%FBS的PBS新鮮組織約200mg(黃豆粒大小),如圖1.1.取一個5mL離心管,加入2160μLBuferA,放...
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Alzet微量滲透泵準確性驗證方法
2025-03-04
Alzet微量滲透泵準確性驗證方法|實驗科學(xué)三重復(fù)合校驗一、核心驗證維度Alzet微量滲透泵準確性驗證——理論值校驗計算泵工作周期:TEXT理論釋放量(μL/hr)=泵容量(μL)÷設(shè)計時長(hr)例:型號2004(容量220μL/28天)理論流速應(yīng)維持在:220μL/(28×24)≈0.327μL/hrAlzet微量滲透泵準確性驗證——體外基線測試(預(yù)實驗必需)裝載1%亞甲基藍溶液測量擴散環(huán)直徑日變化(需顯微標尺,誤差<5μm)37℃生理鹽水浸沒定時稱重(精度0.1mg)精...
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特異性內(nèi)切酶與限制酶的區(qū)別
2025-03-03
特異性內(nèi)切酶與限制酶有什么區(qū)別呢?今天這期幫大家更好的分清他們兩個~一、定義本質(zhì)差異維度限制性內(nèi)切酶特異性內(nèi)切酶所屬范疇原核生物防御系統(tǒng)組分涵蓋所有序列特異性切割的DNA酶進化來源細菌/古菌為保護自身DNA進化包括病毒、真核生物等更廣泛來源核心功能切割外源DNA(如噬菌體)執(zhí)行特定序列切割(不局限于防御功能)二、分子特性對比1.識別模式限制酶:嚴格4-8bp回文/非對稱序列(如EcoRⅠ識別GAATTC)特異性酶:可能識別更長/特殊結(jié)構(gòu)(如歸巢內(nèi)切酶識別30bp序列)2.切割...
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間充質(zhì)干細胞的分離——脂肪MSC分離培養(yǎng)
2025-02-28
問充質(zhì)干細胞(MSC)是一種源自中胚層的多能干細胞,能夠從骨、脂肪、臍帶、胎盤、臍血、皮膚等多樣的組織里分離獲取,具有強大的增殖能力和多向分化潛能,不僅能分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等,還能分化為肌細胞、肝細胞、胰島細胞等多種細胞類型。間充質(zhì)干細胞在組織工程、基因治療和免拉治療等諾多方面展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景,為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域帶來了新的希望和突破方向,對于多種疾病的治療和研究都有著重要意義。一、小鼠脂肪組織獲取1.3天齡到4周齡(推薦小周齡)小型,頸椎脫白法處死后于75%酒精浸...
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間充質(zhì)干細胞的作用
2025-02-28
間充質(zhì)干細胞(Mesenchymalstemcells,MSCs)屬于起源于中胚層的多能干細胞,廣泛存在于人體幾乎所有組織中,如骨髓、牙髓、脂肪、臍帶、皮膚等。在嬰兒的圍產(chǎn)組織和成體組織中都能窺見MSCs的“身影”。因此,MSCs易分離獲取,并在體外大量擴增,為細胞治療提供足夠的“原材料”。1多向分化能力間充質(zhì)干細胞(MSCs)展現(xiàn)驚人的多向分化潛能,其生物學(xué)特性顛fu傳統(tǒng)發(fā)育學(xué)認知:三維跨越分化:?中胚層:脂肪/成骨/軟骨細胞(分化效率>90%)?外胚層:神經(jīng)前體細胞(Ne...