Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的常見(jiàn)問(wèn)題

　　你知道Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！
 

　　一、RNA效率低的原因：
 

　　1)樣品裂解或勻漿處理不干凈；
 

　　2)最后得到地RNA沉淀未溶解；
 

　　3)樣品勻漿時(shí)加的TRIzol過(guò)少；
 

　　4)勻漿樣品后未在室溫下放至5分鐘；
 

　　5)吸取水相時(shí)混有有機(jī)相；
 

　　6)RNA沉淀未溶解等。
 

　　二、A260/A280<1.65的原因：
 

　　1)檢測(cè)吸光度時(shí)，RNA樣品不是溶于TE，而是溶于水。低離子濃度和低PH條件下，A280值會(huì)較高；
 

　　2)樣品勻漿時(shí)加地試劑量太少；
 

　　3)勻漿后樣品未在室溫放置2分鐘；
 

　　4)水相中混有有機(jī)相；
 

　　5)最后得到地RNA沉淀未溶解；
 

　　三、RNA降解原因：
 

　　1)組織取出后沒(méi)有馬上處理或冷凍；
 

　　2)樣品或提取地RNA沉淀保存于-5℃-20℃，未在-60℃-70℃保存；
 

　　3)細(xì)胞在胰酶處理時(shí)被破壞；
 

　　4)溶液或離心管未經(jīng)RBase去處理；
 

　　四、Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的使用注意事項(xiàng)：
 

　　1)在進(jìn)行RNA提取實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用獨(dú)立的RNA提取專用試驗(yàn)臺(tái)；
 

　　2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿好實(shí)驗(yàn)服，佩戴一次性滅菌手套，佩戴口罩，避免講話交流等，防止您的唾液和汗液中的RNaes酶污染實(shí)驗(yàn)；
 

　　3)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量使用一次性滅菌滅酶的塑料器皿，若不得不使用玻璃器皿，可以選擇使用0.1%的DEPC水浸泡處理24 h后再高壓滅菌去除DEPC，也可以使用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌；
 

　　4)RNA提取實(shí)驗(yàn)中使用的所有器具及耗材都建議專門使用，并建議耗材設(shè)立一個(gè)獨(dú)立的區(qū)域存放，不與其他實(shí)驗(yàn)混用；
 

　　5)RNA提取實(shí)驗(yàn)中所用的試劑也應(yīng)專用，不與其他實(shí)驗(yàn)混用，所用的無(wú)菌水需要使用0.1%的DEPC處理后進(jìn)行高壓滅菌。
 

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