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更新時間:2025-10-11
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轉(zhuǎn)染試劑是分子生物學(xué)與遺傳學(xué)領(lǐng)域中的小幫手。在它的幫助下,科研人員可以將外源基因如DNA或RNA導(dǎo)入到細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。然而,為了保證高轉(zhuǎn)染效率并保護(hù)細(xì)胞不受破環(huán),正確的使用和儲存轉(zhuǎn)染試劑是至關(guān)重要的。不當(dāng)?shù)谋4婵赡軙?dǎo)致轉(zhuǎn)染試劑的性能有所下降,從而影響實(shí)驗的準(zhǔn)確性。本文將探討Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的保存條件、如何正確儲存該轉(zhuǎn)染試劑以及實(shí)驗中可能會遇到的問題。
一、 保存條件與正確儲存方法
正確的儲存是保證PEI轉(zhuǎn)染效率和使用壽命的基石。

1. 儲存溫度:
未滅菌的粉末或濃縮液: 應(yīng)長期保存在 -20°C。這是最關(guān)鍵的一點(diǎn),可以最大限度地保持其活性和穩(wěn)定性。
已過濾除菌的工作液(如1 mg/mL): 可以在4°C保存,也可以在-20°C保存。
4°C保存: 方便使用,避免了反復(fù)凍融。在4℃下可以穩(wěn)定保存數(shù)月甚至更久。
-20°C保存: 對于計劃長期儲存(超過半年)的工作液,建議分裝后存于-20°C,以保持最佳性能。
2. 分裝策略:
強(qiáng)烈建議進(jìn)行分裝! 無論是粉末還是配制好的工作液,都應(yīng)根據(jù)您的日常使用量,分裝到無菌的小管中。
目的: 避免反復(fù)凍融和細(xì)菌污染。反復(fù)凍融是導(dǎo)致PEI轉(zhuǎn)染效率下降和溶液出現(xiàn)沉淀的主要原因之一。
3. 溶解與配制:
粉末配制:
使用無菌的去離子水(如Milli-Q水)溶解粉末,配制成高濃度儲備液(如10 mg/mL)。
溶解時,需要用鹽酸(HCl)將pH值小心地調(diào)節(jié)至2.0左右,并加熱(如50-60°C)以幫助其wanquan溶解。
wanquan溶解后,再用NaOH將pH值回調(diào)至7.0。
最后,必須使用0.22μm的濾膜進(jìn)行過濾除菌。
工作液稀釋: 將無菌的儲備液用無菌水稀釋成常用的工作液濃度(如1 mg/mL)。同樣需要確保無菌操作。
4. 穩(wěn)定性:
在正確儲存條件下(-20°C, 避免反復(fù)凍融),PEI非常穩(wěn)定,可以保存數(shù)年。
二、 實(shí)驗中可能遇到的問題及解決方案
PEI轉(zhuǎn)染的成功依賴于多個因素的精細(xì)平衡。以下是常見問題及其排查方向:
請看《PEI轉(zhuǎn)染實(shí)驗中可能遇到的問題及解決方案》
總結(jié): Polysciences PEI是一款強(qiáng)大且經(jīng)濟(jì)的工具,但其成功應(yīng)用依賴于正確的儲存、精確的比例優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化的操作。如果遇到問題,請從PEI/DNA比例、DNA純度、細(xì)胞狀態(tài)和復(fù)合物形成過程這幾個核心環(huán)節(jié)逐一排查。
Polysciences 代理——天津益元利康生物科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)的科技企業(yè),由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團(tuán)隊和管理團(tuán)隊組建而成,專營進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國外品牌簽下代理,RD、Abcam、CST、Genetex、Biolegend、ebioscience、polypure、polyplus、Bethyl、Novus等,能為廣大科研用戶提供數(shù)萬種試劑、儀器和實(shí)驗消耗品。
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