簡石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407操作步驟

簡石瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。

一、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)：

1. 從瓊脂糖凝膠中快速（15分鐘）高產(chǎn)量地回收超純的DNA；

2. 特制的微量柱設(shè)計(jì)使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積（≥10 µl）；

3. 洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測(cè)序、標(biāo)記、PCR等應(yīng)用。

二、操作使用：

（以下離心操作步驟的離心力均在10,000 - 16,000 x g之間進(jìn)行）

簡石DNA回收試劑盒操作步驟一：

使用刀片或手術(shù)刀把DNA片段從瓊脂糖凝膠上切除下來并且移置到 1.5 ml 小型離心管內(nèi)。注意: 從凝膠上切下的瓊脂糖盡可能的要少。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟二：

將3倍體積的ADB溶膠液 添加到每1體積從凝膠上切下的瓊脂糖切塊中。例如: 對(duì)于100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊，添加300 µl的ADB緩沖液。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟三：

在37-55℃下溫水浴10分鐘直到凝膠切塊完quan溶解。注意：確定凝膠切塊完quan溶解是很重要的步驟，在溫水浴過程中可輔以溫和的攪拌有助于凝膠的溶解。如果DNA大小超過8kb，加熱之后需要額外添加等量膠塊體積的水。 例如：100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊，添加300 µl的ADB緩沖液，加熱之后添加100µl的水。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟四：

溶解的瓊脂糖切塊溶液放到1號(hào)C中并把柱套在收集管里。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟五：

離心1分鐘后，倒掉過濾液。注意：柱所能容納的樣品體積為800 µl，所以，如果樣品體積超過800 µl時(shí)，柱就要被多次填充和離心。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟六：

添加200µl的DNA洗滌液到柱中離心1分鐘，去除濾出液。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟七：

重復(fù)第6步洗滌步驟。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟八：

可選步驟：將收集管中的廢液倒掉，并將1號(hào)C套回收集管中額外離心2分鐘，盡量除去洗滌液，以免洗滌液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。

簡石DNA回收試劑盒操作步驟九：

直接添加10 µl DNA洗脫液到柱基質(zhì)中，將柱套在1.5 ml離心管中離心1分鐘來洗脫DNA。注意：從柱中洗脫出的DNA產(chǎn)量與pH和溫度有關(guān)。如果使用水來洗脫，確保pH是 >6.0。在向柱中加入水后靜置1分鐘可增加較大 (> 6 kb) DNA 的產(chǎn)量。在60-70℃的水中洗脫DNA可增加較大DNA (> 10 kb)的產(chǎn)量。

注意：如果試驗(yàn)需要的話，TE緩沖液 (10mMTris-HCl ，1mM EDTA，pH8.0) 或改進(jìn)的TE(10mM Tris-HCl，0.1mMEDTA，pH8.5) 也可用來洗脫。

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