親和層析填料的應(yīng)用原理及其優(yōu)勢

親和層析填料是根據(jù)生物分子間親和力具有專一性而設(shè)計的層析技術(shù)，是生物大分子的生物學(xué)特異性，這種專一性的親和力體現(xiàn)在，如激素和受體、抗原和抗體、酶蛋白和輔酶、酶和酶抑制劑（或配體）等。以抗原和抗體為例，在一定條件下，抗原抗體能緊密地結(jié)合在一起形成復(fù)合物。若將復(fù)合物的一方固定在不溶性載體上，則可從溶液中專一地分離和提純另一方。與其他純化方法相比，親和層析的純化作用強(qiáng)，效果好，最重要的是，純化速度快，有時僅一步即可達(dá)到純化的目的。

親和層析填料具有三大優(yōu)點：

1.純化步驟少、純化純度高。親和層析填料是一種極為有效的分離蛋白質(zhì)的方法，通常情況下，一步法即可達(dá)到純化的目的，更為關(guān)鍵的是，純化的純度高。　　

2.對不穩(wěn)定蛋白純化更有利。親和層析填料能有效的進(jìn)行物質(zhì)純化，對生物分子吸附和分離具有選擇性，純化倍數(shù)高。同時，在純化過程中，蛋白得到濃縮，結(jié)合到親和配基后，性質(zhì)更穩(wěn)定，活性回收率更高、純化步驟更少、純化時間更短、對不穩(wěn)定蛋白的純化更有利。

3.分離效果優(yōu)良（較大容量載體同樣）。除特異性的吸附外，仍然會因分子的錯誤認(rèn)別和分子間非選擇性的作用力而吸附一些雜蛋白質(zhì)，另外在洗脫過程中，配體不可避免的脫落進(jìn)入分離體系。親和層析填料正確地選擇合適的配體和結(jié)合方式，對獲得具有優(yōu)良分離效果和較大容量的載體同樣具有重要作用。能與分離物質(zhì)牢固、特異和可逆結(jié)合的物質(zhì)都可以作為配體。選擇配體有兩個條件：第一是生物大分子與配體間具有合適的親和力，親和力太強(qiáng)，洗脫條件劇烈，易造成生物大分子失活，親和力太小，解離容易，結(jié)合率不高。第二是配體要具有雙重功能，既有可牢固與載體結(jié)合的基團(tuán)，結(jié)合后又不影響生物大分子與配體間的親和力。