PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

（1）規(guī)格

常見(jiàn)的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下

管：0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL

96 孔板：0.2 mL, 0.1 mL

384 孔板：0.02 mL

PCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積。如果加入過(guò)多的樣品，一方面會(huì)導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降，另一方面會(huì)導(dǎo)致樣品溢出或者污染；如果加入的樣品過(guò)少，又會(huì)因?yàn)轭l繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā)，進(jìn)而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗，實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差或者無(wú)結(jié)果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來(lái)決定，以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配。

（2）高度

PCR/qPCR管/板有不同高度的選擇，其中“低容（low profile）"的管/板意思是說(shuō)，與普通的管/板相比，它們的高度更低，這樣的設(shè)計(jì)能最大成大的減少反應(yīng)體系上方的空間，減少了蒸發(fā)對(duì)體系的影響，并且提高了熱傳導(dǎo)的效率。因此更推薦優(yōu)先使用低容的管/板。

（3）厚度

PCR/qPCR管/板要求管壁厚度的一致性，可以保證熱傳導(dǎo)的一致性。除標(biāo)準(zhǔn)厚度外，目前超薄壁的耗材也受到了廣泛的應(yīng)用，這種超薄壁的管/板管壁厚度約是標(biāo)準(zhǔn)版的50%，可以進(jìn)一步減少熱障，使熱傳遞進(jìn)行更快，PCR反應(yīng)更加穩(wěn)定。

（4）透明度

對(duì)于普通PCR來(lái)說(shuō)，管材的透明度對(duì)擴(kuò)增結(jié)果無(wú)影響。對(duì)于qPCR來(lái)說(shuō)，管身應(yīng)選擇不透明的白色或者磨砂質(zhì)地的，而管蓋或者密封膜則要求具有高度的光學(xué)透性，以保證熒光信號(hào)的傳遞最佳，并且降低反應(yīng)中的失真。